问:人源化小鼠模型对人类生物医学研究贡献有多大?
- 答:人源化小鼠模型是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型。这种模型通常被用于人类疾病体内研究(in vivo study)的活体替代模型。由于人类生理与动物生理有显著的差别,利用动物模型得到的实验结果有时不能适用到人体上。比如,有些利用小鼠等动物模型开发的药物在人体上并没有效果。所以,利用转基因或同源重组的方法,将人类基因“放置”在小鼠模型上所制备的人源化小鼠模型,大大提高了这类小鼠模型作为模拟某些人类疾病的有效性。
应用:在艾滋病、癌症、传染病、人类退化性疾病、血液病研究领域等都有广泛的应用;药物临床前模拟实验。
我也是抄的,其实就是改造过的小白鼠。
问:人源化抗体是如何制备的?protocol越详细越好。
- 答:据我了解。。以G抗体来讲。。除了超变区的CD1,CD2,CD3保留鼠源化之外。。其他的地方全部人源化。。可以产生两种:1》人鼠嵌合抗体和2》完全人源化抗体,具体的原理是1》利用基因重组技术,先得到鼠单抗重轻链可变区的基因片段,将其插入控制人单抗恒定区的基因载体上,表达便可以产生嵌合式抗体。。2》首先将小鼠表达鼠源化单抗重轻链的基因剔除,制备表达人源化单抗重轻链基因的转基因小鼠,上诉两种小鼠进行回交,产生只表达人lg的小鼠,用抗原免疫之后即可获得。。我就知道这些啦,,希望对你有所帮助,累死我啦
问:制备转基因小鼠的原理是,目的基因在小鼠体内成功表达的原因是什么
- 答:以“限制性核酸内切酶”在特定的切点上切割DNA分子,将两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端可以相互黏合,脱氧核糖和磷酸构成的骨架要用DNA连接酶“缝合”
- 答:组成生物的DNA分子 的空间结构和化学组成 一致,表达成功是所有生物共用一套密码子
问:如何用crisp/cas9制作转基因小鼠
- 答:您好,具体制备的流程如下:针对待转入外源基因的位点进行sgRNA的设计,同时做靶位点的测序;进行sgRNA-Cas9质粒的构建;sgRNA活性检测;sgRNA-Cas9质粒体外转录成mRNA;带有外源基因的打靶载体构建;小鼠受精卵的分离;mRNA注射入小鼠受精卵;受精卵移植代孕母鼠的输卵管;小鼠出生后进行基因型鉴定。
利用CRISPR/Cas9技术制备的转基因小鼠是定点插入,不同于传统的随机转基因。