一、异体真皮对复合皮功能重建的作用研究（论文文献综述）
沈余明[1]（2021）在《复杂软组织缺损的修复策略与功能重建》文中研究说明复杂软组织缺损往往伴有深部组织如肌腱、神经、血管、肌肉、骨关节甚至器官损伤与缺损,不仅需要修复创面,而且还需行功能康复。复杂性软组织缺损涉及范围广、深度深、局部感染重,有的患者年老体弱且往往伴有较多的合并症（糖尿病、血管性疾病、肿瘤等）,给临床修复与重建带来极大的困难。笔者就复杂软组织缺损的定义与分类、评估、修复重建的原则和方法等多方面进行全面深入的分析,以指导复杂软组织缺损的修复与功能重建。
钟日晟[2]（2019）在《抗感染/抗炎功能化组织修复材料的制备与性能研究》文中进行了进一步梳理组织修复包括创面愈合和组织再生两个层面,利用组织修复材料修复受损组织或器官,达到其结构与功能的完整再生,是临床上一个重要的课题。而感染性或非感染性的炎症,都会导致组织修复失败,甚至危害病患生命健康。通过对组织修复材料复合具有抗感染/抗炎性能的功能化修饰因子,并研究其作用机理,可针对解决组织修复时面临炎症易导致治疗失败的威胁,提供新对策,具有重要研究意义。针对此本论文进行了以下研究:（1）采用体外蛋白酶降解法制备获得的SIS材料降解产物,分子量集中于1017 kDa,具有强抑菌性能。采用涂覆-冻干法制备获得的pSIS/COL I复合冻干多孔支架,成功赋予支架强抑菌性能。复合支架具有“功能化修饰多孔涂层填充多孔”的特殊结构。复合支架生物相容性良好,共培养的MG-63细胞正常黏附、生长,且形貌正常;在d 3细胞增殖率增加了42%。（2）采用涂覆-冻干法制备获得pSIS/SIS复合组织修补片,成功赋予补片强抑菌性能。补片微观形貌为致密且具有一定取向的胶原束,复合涂层大致沿该取向分布,且涂层改性后补片亲水性得到显着提高。复合补片生物相容性良好,共培养的MG-63细胞胞正常地生长、增殖,且形貌正常。复合补片浸提培养液对MG-63细胞具有促增殖作用。复合补片具有良好的组织相容性,动物体内植入补片周边无出现囊肿或炎症现象;细胞在补片内长入情况良好,长入细胞健康地生长和增殖,在自身周边分泌出大量细胞外基质。（3）采用物理共混和静电纺丝法制备出纤维分布均匀的载花旗松素/PHBV纤维薄膜,其纤维尺寸为0.911.01μm。在IL-1β胁迫的模拟体内炎症环境模型下,二醋酸荧光素活细胞染色结果表明,花旗松素质量浓度为0.04 wt%和2.5 wt%的载药薄膜对软骨细胞具有表型保护作用和促增殖活性;花旗松素质量浓度为0.04 wt%的载药薄膜对软骨细胞SOX9基因的转录水平有显着上调的调控作用。综上所述,本论文发现通过复合抗感染/抗炎因子制备组织修复材料具备较好的抑菌/抗炎性能,并进一步评价了复合组织修复材料生物相容性或组织相容性,为抗感染/抗炎组织修复材料应用于临床治疗奠定了理论基础。另外,拓展研究了载花旗松素/PHBV静电纺丝纤维薄膜对炎症环境中组织的修复过程的影响,表明中药活性成分可以增强软骨细胞在炎症环境中生物活性。
崔泽龙[3]（2019）在《烧伤瘢痕表皮结合组织工程真皮治疗瘢痕的临床研究》文中研究说明研究目的和背景:通过对我院烧伤瘢痕整形病例分别应用脱细胞异体真皮（acellular dermal matrix,ADM北京桀亚莱福生物技术有限责任公司）、植入式人工真皮（皮耐克Pelnac?:Gunze Limited,Japan）)两种组织工程真皮联合瘢痕表皮移植与传统的自体中厚皮移植进行疗效比较,探讨大面积烧伤瘢痕患者整形修复中利用组织工程真皮联合瘢痕表皮移植取代自体中厚皮移植的可行性及有效性,为临床大面积烧伤瘢痕患者整形提供可靠的皮肤移植来源。研究方法:收集2016年9月至2018年9月到我院治疗的烧伤瘢痕患者90例,以随机数字表法随机分为三组,分别为脱细胞异体真皮联合瘢痕表皮移植治疗组（A组）、植入式人工真皮联合瘢痕表皮移植治疗组（B组）、自体中厚皮片移植治疗组（C组）,每组患者30例。半年后对每组患者进行随访,比较三组患者的创面愈合时间;采用温哥华瘢痕量表（Vancouver scar scale,VSS）对比评价瘢痕情况;参照ADL分级标准评定患者关节功能;同时切取组织进行病理活检,对比观察瘢痕形态学改变。研究结果:1.创面愈合时间:A组（12.07±2.01）天,B组（22.23±1.76）天,C组（11.33±2.05）天。A、B组和B、C组组间差异有统计学意义（p<0.01）;A、C组组间差异无统计学意义（p>0.05）。B组患者创面愈合时间较A、C组长;2.随访时瘢痕VSS评分:A组（4.10±1.67）分,B组（4.40±1.94）分,C组（5.07±2.35）分。各组间瘢痕情况评分差异均无统计学意义（p>0.05）。分别比较三组患者入院时以及随访时瘢痕VSS评分结果,均显示p<0.05,差异均有统计学意义;3.随访时ADL关节功能评定:A组（优5例,良12例,中10例,差3例）,B组（优4例,良11例,中10例,差5例）,C组（优7例,良14例,中6例,差3例）。各组间ADL关节功能评定结果差异均无统计学意义（p>0.05）。分别比较三组患者入院时以及随访时ADL关节功能评定结果,均显示p<0.05,差异均有统计学意义;4.瘢痕组织病理活检:A组10例,B组9例,C组10例,三组标本组织学形态相似:均显示真皮层炎细胞消失,血管减少,胶原纤维轻至中度增生,均未形成瘢痕疙瘩。研究结论及意义:1.植入式人工真皮（皮耐克）联合瘢痕表皮移植组创面愈合时间较长,脱细胞异体真皮联合瘢痕表皮移植和自体中厚皮移植两种治疗方法创面愈合时间无明显差异;2.三种方法对于瘢痕修复及关节功能恢复均有显着疗效,各组间疗效无显着差异;3.对于大面积烧伤瘢痕需要整形的患者如自体中厚皮不足可选择脱细胞异体真皮联合瘢痕表皮移植或植入式人工真皮（皮耐克）联合瘢痕表皮移植治疗。组织工程真皮联合烧伤瘢痕表皮移植既可避免供皮区新的瘢痕,又可以达到和自体中厚皮同样的治疗效果。脱细胞异体真皮联合瘢痕表皮移植还可以缩短治疗周期。
吴晴晴[4]（2019）在《脱细胞猪小肠黏膜下层与脱细胞猪真皮基质作为真皮支架的对比研究》文中进行了进一步梳理目的应用脱细胞猪小肠黏膜下层作为真皮支架与SD大鼠自体刃厚皮片进行复合移植,修复SD大鼠全层皮肤缺损,与猪脱细胞真皮基质比较,分析大鼠创面的一般情况,成活率,收缩率及组织学特性,从而为脱细胞猪小肠黏膜下层进一步行临床试验提供理论依据。方法 1实验动物分组 将36只SD大鼠用随机区组法随机分为A组（实验组）和B组（对照组）,每组18只。A组为脱细胞猪小肠黏膜与自体刃厚皮片复合移植,B组为猪脱细胞真皮基质与自体刃厚皮片复合移植。2实验大鼠全层皮肤缺损模型制作与处理（1）于背部避开脊柱做1个2.5*2.5cm的全层皮肤缺损,取下的皮片备用。（2）两组真皮支架材料与创面缝合固定,取下的皮片使用剪刀手工修剪处理成刃厚皮片,覆盖于皮肤生物补片上,缝合固定,加压包扎。3于术后2周,4周,8周,12周观察大鼠术后的一般情况,创面愈合情况,并对创面进行拍照使用Image-J图像分析软件进行分析,计算创面成活率和创面收缩率,后采用spss19.0统计学软件分析。4术后4、8、12周分别处死各组动物并进行大体解剖,将植皮区连同周围正常组织作为标本,4%多聚甲醛固定,常规石蜡切片,HE染色,显微镜观察病理学改变,包括炎性细胞浸润,上皮细胞、成纤维细胞生长、胶原排列、毛细血管结构及生物补片降解等。结果1 一般情况观察 各组动物在植皮手术后其进食、进水情况均正常,活动自如,精神状态佳。2创面情况观察 每次更换敷料时,均观察创面,结果发现两组创面均未出现异常红肿渗出及出血情况,敷料未见松脱。3创面愈合情况（1）植皮区成活情况术后2周,实验组皮片存活率（96.0±9.6）%高于对照组（87.8±18.1）%,差异无统计学意义（P>0.05）。（2）植皮区收缩情况术后4周,实验组创面收缩率（26.2±16.1）%低于对照组（28.9±19.5）%,但差异无统计学意义（P>0.05）。术后8周,实验组创面收缩率（27.5±5.3）%低于对照组（33.3±20.2）%,但差异无统计学意义（P>0.05）;术后12周,实验组创面收缩率（30.3±22.0）%低于对照组（40.8±17.6）%,差异有统计学意义（p<0.05）。4组织学观察 术后4周,两组的植入材料与移植皮片融合度均很好,植入材料内及其周围均有大量的成纤维细胞和新生毛细血管长入,并有炎症细胞浸润。术后8周,两组植入材料内及其周围均有成纤维细胞和新生毛细血管长入,炎症细胞较术后4周时少。两组植入材料的原有胶原纤维结构尚清晰,出现疏松。术后12周,两组的植入材料基本被新生胶原纤维替代,新生胶原纤维排列规则有序,与表皮面基本平行,血管非常丰富。结论1本实验证明脱细胞猪小肠黏膜下层联合自体刃厚皮修复大鼠全层皮肤缺损与猪脱细胞真皮基质的皮片成活率和早期的创面收缩率无明显差异。2本实验证明脱细胞猪小肠黏膜下层联合自体刃厚皮修复大鼠全层皮肤缺损较猪脱细胞真皮基质更能改善创面后期瘢痕形成,效果较佳。3本实验所使用的脱细胞猪小肠黏膜下层进行进一步临床试验有一定的可行性。
刘畅[5]（2017）在《海洋细菌的筛选鉴定及海洋细菌蛋白酶在组织工程中的应用潜力评价》文中指出海洋作为地球上最重要的生态系统之一,蕴含了大量的生物资源。由于海洋特有的环境因素,海洋微生物进化出了多样而且独特的生理机制来适应多变的海洋极端环境,具有多种催化活性的新型蛋白酶已经从可培养的海洋微生物中获得。很多海洋来源的活性蛋白酶已经制备成各类药用制剂用于伤口清创、血栓溶解和促进伤口愈合等方面。因此海洋微生物产的活性蛋白酶具有很大的医学应用潜力和价值。组织工程和再生医学主要是为了发展那些可为缺损组织和器官提供修复、再生或替代功能的生物基体或支架,以期建立可对损伤组织或器官进行形态和功能修复的方法。相比于人工合成材料和仿生生物材料,天然生物材料以其低毒性和高细胞相容性成为制备组织支架的首选材料。而以胶原蛋白为主的天然机体组织通过脱细胞处理后制备的细胞外基质（Extracellular matrix,ECM）支架,在生物化学组成和质地方面最大程度地接近天然状态,使得该材料被用作修复受损组织的有效替代物。目前主要通过化学、物理和酶解的方法进行组织脱细胞,酶解法因有毒物质残留低和对ECM损伤较小而被广泛应用。目前可用于组织脱细胞的酶较少,主要为胰蛋白酶、中性蛋白酶和核酸酶,但胰蛋白酶和中性蛋白酶对ECM中的胶原蛋白都有一定的破坏作用,而核酸酶很难将ECM中的免疫源性物质去除。因此,开发可应用于组织脱细胞的新型蛋白酶,对建立优良的ECM支架制备方法具有重要意义。组织再生过程需要在不同的细胞群体和组织器官之间传递大量的信息,生长因子在信息传递、促进细胞迁移、促进细胞分化、血管发生、刺激基质形成,并最终在受损组织重建中起着重要作用。如何将生长因子安全有效的负载在ECM支架上,制备具有更好修复效果的生长因子/ECM复合支架,是组织工程和研究热点。因此,设计并开发可使生长因子结合在ECM支架表面的结合系统,是提高以ECM为基础的支架性能的关键。本研究首先从海水和海洋沉积物样品中分离海洋细菌,获得微生物资源,为细菌及其蛋白酶的研究和开发奠定基础。菌株Myroides profundi D25和菌株Pseudoalteromonas sp.SM9913是本实验室从深海沉积物中分离获得的两株产蛋白酶细菌。前期研究表明,菌株D25分泌一种弹性蛋白酶myroilysin,对胶原蛋白没有降解活性,也不破坏胶原蛋白基本结构,但对胶原蛋白具有很强的膨胀作用。菌株SM9913分泌的胶原蛋白酶MCP-01中的C-端包含的多囊性肾病（Polycystic kidney disease,PKD）结构域对胶原蛋白有较强的吸附能力。本研究通过利用myroilysin膨胀胶原蛋白的性质制备以胶原蛋白为主要成分的ECM支架,利用PKD结构域结合胶原蛋白的性质,将PKD结构域与血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）和转化生长因子（Transforming growth factor,TGF）融合,制备可吸附胶原蛋白的融合蛋白PKD-VEGF和PKD-TGF,并用于制备负载生长因子的ECM复合支架。通过对支架进行全面的理化性质、生物学性质和动物模型检测,探索其在临床应用中的潜力。1.海洋细菌资源的筛选和多相分类学鉴定对采集自南北极的海水和海洋沉积物样品进行可培养细菌的筛选,筛选得到属于73个细菌种的142个菌株,其中疑似新菌种6株。通过多相分类学研究对筛选得到三株海洋来源的产蛋白酶细菌菌株SM1211T、SM1212T和SM1216T进行了鉴定。对菌株进行分子遗传学、形态学、生理生化和化学分类特征分析后,表明菌株SM1211T代表Rhodobacteraceae科内一个新属的新种,立新属并命名为Puniceibacterium antarcticum sp.nov.;菌株 SM1212T 代表 Flavobacteriaceae科内一个新属的新种,立新属并命名为Arcticiflavibacter luteus sp.nov.;菌株SM1216T为Algimona属中的新成员,命名为Algimonas arctica sp.nov.。新的产蛋白酶细菌菌株的获得,为为进一步研究和开发海洋细菌及其蛋白酶资源奠定了基础。2.利用海洋细菌蛋白酶myroilysin制备猪脱细胞真皮基质（Porcine acellular dermal matrix,PADM）及其性能研究前期研究表明,深海来源的细菌蛋白酶myroilysin对胶原蛋白没有降解活性,但对其有很强的膨胀作用。myroilysin通过降解胶原蛋白中起到交联和稳定结构作用的糖蛋白而导致胶原膨胀,膨胀之后,胶原蛋白氢键没有被破坏,三螺旋结构保存完整,胶原蛋白端肽也没有被剪切。根据myroilysin的这一特性,本研究用myroilysin对猪真皮组织进行脱细胞和膨胀处理,制备以胶原蛋白为主要成分的PADM。对用myroilysin制备的PADM与用SDS和胰蛋白酶制备的PADM进行了全面的物化性质评价和比较。结果表明,myroilysin制备的PADM具有更高的孔隙率、吸水率和体外降解率,并保持了一定的机械强度;与其他两种方法制备的PADM相比,免疫原性物质去除的更彻底,同时还存留了一部分生物活性细胞因子。并且,用myroilysin制备的PADM灭菌方便且彻底,低毒,具有良好的生物相容性。因此,采用myroilysin制备的PADM,满足了组织工程和再生医学中对组织支架制备的要求,可以作为基本ECM支架进行后续的优化和应用潜力评价。3.海洋细菌蛋白酶MCP-01中的C-端PKD结构域与生长因子融合蛋白的制备和功能检测及PKD结构域吸附胶原蛋白的结构基础前期研究表明,深海来源的蛋白酶MCP-01中的PKD结构域能吸附胶原蛋白,但不会破坏胶原蛋白三螺旋结构。本研究将PKD结构域与生长因子VEGF和TGF分别进行融合并在昆虫细胞sf9表达体系中进行异源表达并纯化,获得融合蛋白PKD-VEGF和PKD-TGF。对PKD-VEGF和PKD-TGF进行了蛋白稳定性、胶原吸附能力和细胞诱导活性检测。结果表明,融合表达的生长因子降解速率降低,PKD结构域在融合蛋白中可以行使吸附胶原蛋白的功能,吸附效果好,同时PKD-VEGF和PKD-TGF对人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）具有诱导细胞增殖和分化的活性。因此,通过PKD结构域把VEGF和TGF有效连接到胶原蛋白上,是一种ECM支架负载生长因子的新方法。为了阐明PKD-VEGF和PKD-TGF吸附胶原蛋白的分子机制,本研究对PKD结构域进行了晶体培养和结构解析,通过分子对接（Molecule Docking）模拟了 PKD结构域与胶原分子结合的情况,并分析了 PKD结构域吸附胶原蛋白的分子机制。实验结果表明,PKD结构域由两个平行的β片层组成,每个β片层包含三个反向平行的β折叠,PKD结构域对胶原蛋白的吸附作用主要是通过两者间的静电相互作用完成的。通过PKD结构域对胶原蛋白的吸附作用,PKD-VEGF和PKD-TGF既可以稳定的暴露在支架内微环境中,又不会与支架结合过于牢固,使其维持在利于细胞生长分化的浓度水平。这些结果不仅揭示了 PKD与胶原蛋白的结合机制,也为生长因子在ECM支架上的有效负载提供了新思路。4.全皮层皮肤缺损动物模型的建立及负载生长因子的PADM复合支架临床应用潜力的研究为了探索负载有PKD-VEGF和PKD-TGF的复合支架的临床应用潜力,本研究首先对复合支架进行体外实验检测。体外检测表明,负载生长因子的复合支架具有良好的细胞相容性,为细胞生长提供了空间支持。为了研究该复合支架在动物体内的效果,本研究建立了大鼠背部全皮层皮肤缺损动物模型,将复合支架植入皮肤组织缺损部位。动物实验表明,填充复合支架对大鼠全皮层缺损的创口愈合有良好的促进作用。创口组织的组织学检测也表明复合支架可以加速创面新生组织的分化,促进血管生成,进而促进缺损组织修复、重构和再生。这些研究显示出该支架具有很好的临床应用前景。综上所述,本研究对海洋细菌资源进行了筛选和多相分类学鉴定,利用海洋细菌蛋白酶myroilysin制备了具有良好性能的组织支架PADM,利用海洋细菌蛋白酶MCP-01中的PKD结构域与生长因子融合制备了可吸附胶原蛋白的PKD-VEGF和PKD-TGF,从而制备了具有很好临床应用前景的负载生长因子的PADM复合支架。本研究表明海洋中蕴含着大量的微生物资源,海洋微生物产的活性蛋白酶具有很大的医学应用潜力和价值。
盛小辉[6]（2016）在《激光微孔脱细胞猪真皮支架对Ⅲ度皮肤烧伤血管化的影响》文中研究表明目的:探讨激光微孔联合反复冻融脱细胞方法制备的激光微孔脱细胞猪真皮支架对大鼠Ⅲ度皮肤烧伤创面愈合作用及血管化的影响,为临床提供理想的真皮支架材料。方法:第一步:采用激光打微孔+低浓度胰蛋白酶+反复冻融+恒温振荡制备的异种脱细胞猪真皮基质,HE染色检测;第二步:将制备的激光微孔异种脱细胞猪真皮和普通打孔异种脱细胞猪真皮进行皮下埋植实验。具体方法:24只300g左右成年雄性无病原体级SD大鼠,将两种真皮基质分别埋植于SD大鼠背部左右两侧皮下,术后3天、1周、2周和3周掀开皮瓣进行真皮基质HE染色和CD31免疫组化染色标记。第三步:复合皮移植实验。具体方法:72只300g左右成年雄性无病原体级SD大鼠,依据真皮移植物的不同,分为激光微孔脱细胞猪真皮（A组）、普通打孔脱细胞猪真皮（B组）两种真皮支架分别移植至Ⅲ度烧伤清创后创面,另一组创面清创后仅覆盖油纱（C组）,术后1周在异种猪真皮（A和B组）或者肉芽上（C组）植入表皮,大体观察植入真皮支架1、2、3周创面的修复情况,并通过HE染色和免疫组化标记创面中CD31、α-SMA表达阳性血管并计数。结果:制备的脱细胞猪真皮呈瓷白色,有光泽,柔软;显微镜下未见细胞残留,真皮胶原结构完整。皮下埋植实验3周结果显示:真皮基质与大鼠受皮组织相容性好,无排斥反应;CD31标记的阳性血管数:术后3天两组无明显差异（P>0.05）,埋植术后1周、2周和3周,微孔组表达阳性血管数均明显多于普通孔组,差异具有统计学意义（P<0.01）。复合皮移植实验结果:两组脱细胞真皮支架及无支架对照组植入后13周创面中CD31、α-SMA表达阳性血管数均持续增加,其中A组显着高于B、C组（P<0.01）,B组显着高于C组（P<0.01）;真皮支架植入一周后在真皮上植入表皮,表皮移植后一周A组表皮融合成片,B组表皮散在存活皮片生长情况好;术后3周A组表皮皮片融合成片,支架已与创面完全结合;B组表皮开始融合,皮片生长良好,支架与基底结合紧密。结论:1.本实验研究的脱细胞方法脱细胞彻底,基本上达到了祛除所有含抗原成分细胞的效果,真皮支架三维胶原结构完整。2.本研究制备的激光微孔与普通打孔异种脱细胞猪真皮基质与受皮组织相容性好,无免疫排斥反应,均能血管化,但微孔组血管化速度明显快于普通打孔组。3.复合皮移植实验证实,本实验制备的激光微孔脱细胞猪真皮基质能快速血管化,为表皮提供良好营养供应,利于表皮存活,是较为理想的生物支架材料。对于Ⅲ度烧伤的皮肤损伤创面修复具有良好的效果,作为真皮支架具有很好的前景。
柯昌能,刘坡,陈杰明,李艳华,梁大宁[7]（2015）在《脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植烧伤功能部位修复创面》文中进行了进一步梳理背景:临床修复烧伤功能部位创面的主要方法为自体大张刃厚皮片移植,虽能取得一定的治疗效果,但存在移植后质地薄、僵硬、韧差等缺陷,且移植部位瘢痕增生较重,容易引起挛缩畸形,功能恢复比较差。目的:分析复合皮移植烧伤功能部位修复创面的临床效果。方法:将60例（84处）功能部位烧伤创面患者随机均分为2组,观察组给予脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植修复治疗,对照组给予自体大张刃厚皮片移植修复治疗,比较两组皮片成活率及二次手术率;治疗后1个月,采用温哥华瘢痕评分量表评估皮肤色泽、厚度、血管分布及柔软度,同时判定瘢痕程度。结果与结论:观察组皮片成活率显着高于对照组（93%,70%,P<0.05）,二次手术率显着低于对照组（0,13%,P<0.05）。治疗后1个月,观察组皮肤色泽、厚度、血管分布、柔软度各项评分均显着低于对照组（P<0.05）,轻度瘢痕增生率显着高于对照组（52%,29%,P<0.05）。说明采用脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植烧伤功能部位修复创面,能有效提高皮片成活率,降低二次手术率,有利于促进创面愈合,还能有效减轻瘢痕增生程度。
冯玉萍[8]（2014）在《胎牛皮脱细胞真皮基质在组织工程中的应用》文中研究说明应用组织工程技术构建自体来源的新生组织或器官以修复损伤的组织器官一直是再生医学研究领域的一个梦想。将适宜的种子细胞在生物支架材料上培养和诱导，以构建组织工程化的组织或器官（Tissue Engineered tissue or organ），修复组织损伤和器官缺损是再生医学领域的研究重点，而生物支架材料又是组织工程研究的三大要素之一。脱细胞真皮基质是去除皮肤组织中抗原性很强的细胞成分包括表皮、皮肤的附属器（毛囊、皮脂腺、汗腺）和真皮内的血管内皮细胞、成纤维细胞等及皮下脂肪组织后，所剩余的免疫原性相对较弱的细胞外基质及真皮层的胶原纤维网状结构。人皮、猪皮脱细胞真皮基质已广泛用于医学临床的烧伤和创伤修复领域，产生了很好的治疗效果，但受其来源、宗教、价格等方面的限制，使用有一定局限性。因生物制药对胎牛血清的大量需求，导致了很多胎牛皮副产物被废弃。胎牛皮真皮的组织结构与人真皮相似，是天然的生物支架材料。由于胎牛处于生长发育阶段，胎牛皮（特别是35月龄的胎牛皮）的毛囊发育不完善，组成真皮的胶原纤维主要是胶原原纤维，与人皮或猪皮相比，其抗原性成分更易除去，其基质成分更易被机体组织细胞作为营养物质吸收。因此，研究胎牛皮脱细胞真皮基质（FBADM）的制备及其作为组织工程的生物支架和损伤修复的生物敷料，不仅可为胎牛皮的合理开发利用提供理论依据，而且可变废为宝，为组织工程和医学临床提供大量优质的天然生物支架材料，对促进胎牛皮的合理开发利用和我国再生医学的发展具有重要的现实意义和实际应用价值。本文以35月龄胎牛皮制备FBADM，在确定抗原成分被去除后，用FBADM作为三维生物支架，分别以非洲绿猴肾细胞、婴儿皮肤细胞和人骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）为种子细胞，进行体外复合培养，并进一步对复合培养的BM-MSCs进行软骨、神经分化诱导，研究FBADM的生物相容性和作为组织工程生物支架材料的可能性及其在干细胞培养、组织工程皮肤、软骨和神经构建中的应用前景。本论文试验研究分为五部分：第一部分主要研究FBADM的表征与结构。结果显示：以35月龄胎牛皮制备的FBADM在水中呈乳白色，丝绸般柔软、柔韧而富有弹性，具有生物力学性能，耐撕扯和适宜外科手术缝合。扫描电镜显示：FBADM厚度在60200μm之间，由46层胶原纤维网状结构构成。脱细胞处理可能会导致真皮乳头层的表面基底膜发生损伤。在基底膜损伤处胶原纤维纵横交错；在基底膜完整的部位，表面有310μm的孔状结构；真皮皮下组织面呈纤细的胶原纤维网状。石蜡切片H.E染色显示：FBADM主要由胶原纤维构成，无细胞碎片和细胞核物质残留，DNA残留检测阴性，说明抗原性异物处理的干净、彻底。第二部分主要研究FBADM与异种动物的体内生物相容性。分别将1cm2大小的FBADM灭菌、复水后，埋植于威斯特大鼠和昆明小白鼠的背部皮下，饲养观察，检测FBADM对动物的急性毒性和与异种动物的生物相容性。结果：埋植后饲养观察35d，两种试验动物生命体征和饮食正常，未发生急性毒性反应。35d后，解剖部分大鼠和小鼠，制备石蜡切片，观察显示有大量成纤维细胞长入FBADM中，局部有微血管形成，FBADM基质周围未见炎性细胞聚集。提示：在大鼠和小鼠体内，FBADM具有良好的生物相容性，并可促进毛细血管的生成，无免疫排斥反应发生。第三部分主要研究FBADM与异种动物细胞的体外生物相容性和其作为细胞培养支架进行三维立体培养的可能性。结果显示：不论在FBADM周围，还是在FBADM表面及其内部网状组织结构中，非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）均能良好生长、增殖，细胞形态正常。经34次胰蛋白酶消化处理后，Vero细胞仍能在FBADM上良好生长。说明FBADM对异种动物肾细胞细胞无毒性而有良好的生物相容性，对胰蛋白酶的消化具有一定的耐受性，可作为体外细胞三维培养的支架材料。第四部分主要研究FBADM在皮肤组织工程领域的应用。以FBADM为组织工程皮肤支架，并人为将基质剪开、造成损伤后，将婴儿皮肤细胞种植于FBADM上，进行体外复合培养，观察细胞生长和损伤基质的修复。结果：扫描电镜和石蜡切片均显示：皮肤细胞在FBADM表面和内部网状组织中均能良好生长、增殖，并在10d内有新生血管生成；人为剪开的基质缺损，在体外复合培养3556d后，完全长到了一起。表明FBADM与婴儿皮肤细胞不仅有良好的生物相容性，而且可诱导血管的形成，是构建组织工程皮肤的良好支架材料，也可促进组织损伤的修复。第五部分主要研究FBADM作为骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）体外培养和分化诱导培养支架的可能性及BM-MSCs在FBADM上的软骨和神经分化。结果：倒置相差显微镜、扫描电镜、石蜡切片、激光共聚焦显微镜和免疫荧光染色等技术监测显示：将BM-MSCs种植于FBADM上，用HyClone STEM Basal Media（BM）进行三维复合培养，细胞能够良好生长和增殖，834d可自然形成血管和神经样分化结构；45d后，细胞在FBADM上形成了复杂的多层结构；而FBADM原有的相对较粗大、致密的胶原纤维束变得纤细而弯曲。提示在细胞生长增殖的过程中，基质中的胶原纤维可被降解和吸收利用；经软骨分化培养基（CDM）诱导分化培养后，细胞能够在FBADM上增殖，产生大量基质纤维，经软骨基质特异性甲苯胺蓝染色，呈淡红色异染的阳性反应；用神经分化培养基（NDM）诱导分化培养后，形成了抗神经元特异性抗体染色阳性、具有典型的两级和多极神经元形态的细胞，复合培养物表面分化细胞形成了纵横交错的神经网络和神经信号回路。提示了BM-MSCs能够在FBADM上增殖并可向软骨细胞和神经细胞分化，FBADM可作为BM-MSCs培养和软骨与神经分化诱导培养的生物支架。结论：胎牛皮脱细胞真皮基质具有良好的生物相容性，可作为异种动物细胞和干细胞培养的生物支架，培养婴儿皮肤细胞和骨髓间充质干细胞，有利于细胞的增殖，并可促进细胞向血管和神经细胞分化，可作为组织工程皮肤、软骨和神经构建的支架材料，在组织工程皮肤、软骨与神经构建中具有广阔的应用前景。
李守聚[9]（2012）在《异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用》文中提出目的:探讨异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植修复大面积深度烧伤及瘢痕切除后皮肤缺损创面及其愈合后皮肤的外形和功能。方法:应用异体脱细胞真皮基质与自体刃厚皮片组成复合皮移植,以自体刃厚皮片移植作为对照,采用一步移植法治疗切痂后大面积深度烧伤创面及瘢痕切除后皮肤缺损共56例患者60处创面,观察术后皮片的成活情况、外形及功能恢复情况并随访。结果:60处创面全部愈合,移植皮片生长良好,瘢痕增生不明显,未见明显挛缩,皮肤弹性较好。在6～12个月的观察期内,自体刃厚皮片与异体脱细胞真皮基质复合移植后,功能和形态优于单纯自体刃厚皮片移植;随访2年复合移植未发现明显的排异反应。结论:异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植修复大面积深度烧伤及瘢痕切除后皮肤缺损创面愈合良好,无瘢痕增生,皮肤外观功能满意,无排异反应。
何丽霞[10]（2011）在《皮肤扩张器的改造及其在构建自体复合皮中的应用》文中指出目的对传统皮肤扩张器进行改造并应用于构建自体复合皮,评价其可行性,为临床应用提供实验依据。方法1、改造传统皮肤扩张器:将传统单注射壶皮肤扩张器改造成双注射壶,原有的注射壶通向扩张囊内,添置的注射壶通向囊外,扩张囊容量10ml,设计完毕交由上海威宁整形材料制品有限公司加工制作。2、表皮细胞的培养:原代培养兔皮肤表皮细胞,并纯化扩增,为后期细胞种植及进一步实验做好准备。3、自体复合皮的构建:新西兰大耳白兔10只,于其背部皮下各埋植一个新型的皮肤扩张器。埋植扩张器1w后,扩张器的周围形成了纤维包囊,经新增的注射壶注入原代培养的自体表皮细胞悬液,即将表皮细胞种植于扩张囊和纤维包囊的腔隙内,构建自体复合皮。4、自体复合皮的构建效果的观察:将10只新西兰大耳白兔随机分为A、B两组,分别于表皮细胞种植后1w（A组）、2w（B组）取出扩张器,通过肉眼及光镜观察自体复合皮构建结果,即判断纤维包囊是否发生上皮化。结果1、2组实验动物全部存活,伤口均甲级愈合。2、成功分离培养了兔皮肤表皮细胞且纯化扩增。3、A、B两组的纤维包囊肉眼观无显着差别。镜下观,A组纤维包囊表面可见较多的上皮细胞岛,但未形成完整的细胞层;B组的纤维包囊表面可见完整的类似于假复层鳞状上皮的细胞层,即纤维包囊发生了明显的上皮化;纤维层和上皮层结合紧密,形成了类似于皮肤结构的复合皮。结论经改造的新型皮肤扩张器用于体内构建自体复合皮是可行的,发挥着关键性的作用。
二、异体真皮对复合皮功能重建的作用研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、异体真皮对复合皮功能重建的作用研究（论文提纲范文）
（2）抗感染/抗炎功能化组织修复材料的制备与性能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 组织修复材料基础研究与临床应用现状 |
| 1.2.1 非特异性组织修复材料 |
| 1.2.2 特异性组织修复材料 |
| 1.3 组织修复材料类别 |
| 1.3.1 天然脱细胞基质组织修复材料 |
| 1.3.2 人工合成组织修复材料 |
| 1.4 功能化调控因子复合修复材料 |
| 1.4.1 具有抗感染性炎症功能的非特异性组织修复材料 |
| 1.4.2 具有抵抗非感染性炎症功能的组织特异性修复材料 |
| 1.5 研究内容及目的 |
| 第2章 实验原理及材料表征方法 |
| 2.1 实验所需原料与设备 |
| 2.2 材料学表征 |
| 2.2.1 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE) |
| 2.2.2 材料微观形貌观察 |
| 2.2.3 .材料亲水性分析 |
| 2.3 抑菌性能测试 |
| 2.3.1 细菌实验所需试剂配制 |
| 2.3.2 细菌的复苏、扩增与冻存 |
| 2.3.3 组织修复材料抑菌性能测试实验 |
| 2.4 生物相容性评价 |
| 2.4.1 细胞生物学实验所需溶液配制 |
| 2.4.2 人骨肉瘤细胞(MG-63)的复苏与培养 |
| 2.4.3 兔关节软骨细胞的提取与培养 |
| 2.4.4 细胞与组织修复材料的共培养 |
| 2.4.5 荧光素二醋酸(FDA)活细胞染色法 |
| 2.4.6 Alamar Blue法检测细胞增殖 |
| 2.4.7 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR) |
| 2.5 组织相容性评价 |
| 2.5.1 兔皮下pSIS/SIS复合补片植入实验 |
| 2.5.2 植入后pSIS/SIS复合补片的取出及外观大体观察 |
| 2.5.3 苏木精-伊红(H&E)组织学染色 |
| 2.6 统计学分析 |
| 第3章 SIS酶解产物/I型胶原组织工程支架的制备及性能研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料制备及表征方法 |
| 3.2.1 SIS材料体外降解产物 |
| 3.2.2 pSIS/COL I复合冻干多孔支架 |
| 3.2.3 表征方法 |
| 3.3 实验结果与讨论 |
| 3.3.1 SIS材料体外降解产物抑菌性能分析 |
| 3.3.2 SIS材料体外降解产物分子量及分布 |
| 3.3.3 pSIS/COL I复合多孔支架微观形貌 |
| 3.3.4 pSIS/COL I复合多孔支架抑菌性能分析 |
| 3.3.5 MG-63 细胞在pSIS/COL I复合多孔支架上生长形貌 |
| 3.3.6 MG-63 细胞在pSIS/COL I复合多孔支架上增殖活性 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 pSIS/SIS组织修补片制备、表征和生物相容性评价 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料制备及表征方法 |
| 4.2.1 制备pSIS/SIS复合组织修补片 |
| 4.2.2 表征方法 |
| 4.3 实验结果与讨论 |
| 4.3.1 pSIS/SIS复合补片外观及微观形貌观察 |
| 4.3.2 pSIS/SIS复合补片的亲水性 |
| 4.3.3 pSIS/SIS复合补片的抑菌性能 |
| 4.3.4 MG-63 细胞在pSIS/SIS复合补片上生长形貌 |
| 4.3.5 MG-63 细胞在pSIS/SIS复合补片上增殖情况 |
| 4.3.6 MG-63 细胞在pSIS/SIS复合补片浸提培养液培养环境增殖情况 |
| 4.3.7 pSIS/SIS复合补片的组织相容性 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 载花旗松素PHBV静电纺丝纤维薄膜在IL-1β胁迫培养环境下对软骨细胞的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料制备及表征方法 |
| 5.2.1 制备载花旗松素/PHBV静电纺丝纤维薄膜 |
| 5.2.2 表征方法 |
| 5.3 实验结果与讨论 |
| 5.3.1 花旗松素/PHBV纤维薄膜在IL-1β胁迫培养环境下对软骨细胞表型维持作用的观察 |
| 5.3.2 花旗松素/PHBV纤维薄膜在IL-1β胁迫培养环境下对软骨细胞增殖的影响 |
| 5.3.3 花旗松素/PHBV纤维薄膜在IL-1β胁迫培养环境下对软骨细胞表型维持相关基因转录水平的影响 |
| 5.3.4 花旗松素/PHBV纤维薄膜外观及微观形貌观察 |
| 5.3.5 亲水性表征 |
| 5.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录A 攻读学位期间所发表学术论文目录 |
| 致谢 |
（3）烧伤瘢痕表皮结合组织工程真皮治疗瘢痕的临床研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 纳入与排除标准 |
| 1.2 随机分组 |
| 1.3 临床资料 |
| 1.4 研究方法 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 创面愈合时间 |
| 2.2 并发症 |
| 2.3 温哥华瘢痕量表(VSS)评分 |
| 2.4 ADL关节评定 |
| 2.5 组织形态学 |
| 3 讨论 |
| 3.1 瘢痕治疗现状 |
| 3.2 对创面愈合时间差异的分析 |
| 3.3 并发症发生的原因分析及应对 |
| 3.4 三种治疗方法机制分析与比较 |
| 3.5 组织形态学分析 |
| 4 课题研究结论 |
| 5 本课题研究不足 |
| 参考文献 |
| 附件 病例展示 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
（4）脱细胞猪小肠黏膜下层与脱细胞猪真皮基质作为真皮支架的对比研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 序言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论与分析 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 真皮替代物的制备方法、研究进展及临床应用 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词对照表 |
| 在校期间论文发表及获奖情况 |
| 致谢 |
（5）海洋细菌的筛选鉴定及海洋细菌蛋白酶在组织工程中的应用潜力评价（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 研究背景与立题依据 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 海洋微生物资源 |
| 1.1.2 细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)及其在组织工程和再生医学中的应用 |
| 1.1.3 负载生长因子的ECM支架 |
| 1.1.4 组织支架在皮肤伤口愈合中的应用 |
| 1.2 立题依据及研究内容 |
| 1.2.1 立题依据 |
| 1.2.2 研究内容 |
| 第二章 海洋细菌的筛选及多相分类学研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 实验菌株及对照菌株 |
| 2.2.2 主要药品 |
| 2.2.3 主要培养基、试剂及缓冲液 |
| 2.2.4 主要工具酶、质粒及试剂盒 |
| 2.2.5 主要仪器设备与耗材 |
| 2.2.6 主要数据库、分析软件及保藏中心 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 样品的采集 |
| 2.3.2 菌株的分离和保藏 |
| 2.3.3 菌株的分子遗传学特征分析 |
| 2.3.4 菌株的形态学特征分析 |
| 2.3.5 菌株的生理生化特征分析 |
| 2.3.6 菌株的化学分类特征检测 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 海洋可培养细菌的分离与保藏 |
| 2.4.2 菌株SM1211~T的多相分类学性质 |
| 2.4.3 菌株SM1212~T的多相分类学性质 |
| 2.4.4 菌株SM1216~T的多相分类学性质 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 利用海洋蛋白酶myroilysin制备猪脱细胞真皮基质(PADM)及其基本性能研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 主要菌株及细胞 |
| 3.2.2 主要药品及试剂 |
| 3.2.3 主要仪器设备与耗材 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 蛋白酶myroilysin的发酵及纯化 |
| 3.3.2 PADM的制备 |
| 3.3.3 SEM观察PADM |
| 3.3.4 TEM观察ADM |
| 3.3.5 PADM免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)检测 |
| 3.3.6 α-Gal抗原残留检测 |
| 3.3.7 免疫原性物质DNA残留检测 |
| 3.3.8 PADM吸水率检测 |
| 3.3.9 PADM孔隙率检测 |
| 3.3.10 PADM机械强度检测 |
| 3.3.11 PADM体外降解残余量检测 |
| 3.3.12 PADM的灭菌 |
| 3.3.13 PADM毒性检测 |
| 3.3.14 PADM体外细胞相容性实验 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 蛋白酶myroilysin的分离纯化 |
| 3.4.2 Myroilysin对猪皮组织的处理效果 |
| 3.4.3 PADM的制备及外观形态观察 |
| 3.4.4 不同脱细胞处理方法对猪皮组织的微观结构的影响 |
| 3.4.5 不同脱细胞方法对猪皮组织中各类因子存留的影响 |
| 3.4.6 不同脱细胞方法对PADM物理性质及降解性质的影响 |
| 3.4.7 PADM的灭菌 |
| 3.4.8 PADM的细胞毒性检测 |
| 3.4.9 PADM的体外细胞相容性检测 |
| 3.5 讨论 |
| 第四章 海洋细菌蛋白酶MCP-01中的PKD结构域与生长因子融合蛋白的制备及其吸附胶原蛋白的结构基础 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 主要菌株及细胞 |
| 4.2.2 主要工具酶及质粒 |
| 4.2.3 主要药品及试剂 |
| 4.2.4 主要仪器设备与耗材 |
| 4.2.5 主要分析软件 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 引物设计 |
| 4.3.2 表达蛋白基因的获得 |
| 4.3.3 融合蛋白的异源表达及纯化 |
| 4.3.4 融合蛋白的稳定性检测 |
| 4.3.5 融合蛋白对胶原蛋白的吸附性质检测 |
| 4.3.6 融合蛋白活性检测 |
| 4.3.7 PKD结构域的异源表达及纯化 |
| 4.3.8 PKD结构域对胶原蛋白的吸附性检测 |
| 4.3.9 PKD结构域结构解析 |
| 4.3.10 PKD结构域与胶原分子结合机制的解析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 PKD结构域与生长因子融合蛋白的表达 |
| 4.4.2 融合蛋白的稳定性分析 |
| 4.4.3 融合蛋白对胶原蛋白的吸附性能分析 |
| 4.4.4 融合蛋白诱导细胞活性的分析 |
| 4.4.5 PKD结构域的异源表达 |
| 4.4.6 PKD结构域对胶原蛋白的吸附性分析 |
| 4.4.7 PKD结构域蛋白结晶 |
| 4.4.8 PKD结构域吸附胶原蛋白的分子机制 |
| 4.5 讨论 |
| 第五章 全皮层皮肤缺损动物模型的建立及负载生长因子的PADM复合支架临床应用潜力的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.2.1 主要细胞及动物 |
| 5.2.2 主要药品及试剂 |
| 5.2.3 主要仪器及耗材 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 负载生长因子的复合支架的制备 |
| 5.3.2 复合支架的体外细胞相容性 |
| 5.3.3 动物皮肤缺损模型的建立 |
| 5.3.4 复合支架在体内的组织重建检测 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 负载生长因子的复合支架的制备 |
| 5.4.2 复合支架的体外细胞相容性评价 |
| 5.4.3 动物模型的建立流程 |
| 5.4.4 复合支架的临床应用潜力评价 |
| 5.5 讨论 |
| 全文总结及展望 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的论文及获奖情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（6）激光微孔脱细胞猪真皮支架对Ⅲ度皮肤烧伤血管化的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 第一部分 异种猪脱细胞真皮基质皮下埋植 |
| 1.1 对象与方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 脱细胞真皮的制作 |
| 1.1.5 手术方法 |
| 1.1.6 HE检测方法 |
| 1.1.7 CD31免疫组化方法 |
| 1.1.8 统计学处理 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 脱细胞猪真皮支架性状 |
| 1.2.2 大体观察 |
| 1.2.3 HE染色 |
| 1.2.4 CD31免疫组化标记结果 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 异种脱细胞猪皮移植的优势 |
| 1.3.2 异种脱细胞猪皮免疫排斥反应的机理 |
| 1.3.3 本实验制备的真皮基质生物相容性及血管化速度 |
| 1.4 小结 |
| 第二部分 激光微孔脱细胞猪真皮支架复合皮移植 |
| 2.1 对象与方法 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 主要试剂 |
| 2.1.4 脱细胞真皮基质动物模型的制作及实验方法 |
| 2.1.5 脱细胞猪真皮组织结构观察 |
| 2.1.6 CD31和 α-SMA创面免疫组织化学检测 |
| 2.1.7 统计学处理 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 创面大体观察 |
| 2.2.2 组织学观察 |
| 2.2.3 CD31和 α-SMA免疫组化结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 寻求真皮替代物的重要意义 |
| 2.3.2 真皮结构对于创面修复的重要性 |
| 2.3.3 真皮替代物的研究进展 |
| 2.3.4 目前常用的细胞真皮基质的制备方法 |
| 2.3.5 本实验研究制备的脱细胞异种真皮的制备方法与优势 |
| 2.3.6 激光微孔异种脱细胞猪真皮的快速血管化 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 附录 |
| 综述 异种脱细胞真皮的研究及应用进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植烧伤功能部位修复创面（论文提纲范文）
| 0引言Introduction |
| 1对象和方法Subjectsandmethods |
| 2结果Results |
| 3讨论Discussion |
（8）胎牛皮脱细胞真皮基质在组织工程中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Summary |
| 第一部分 文献综述 |
| 一、组织工程概述 |
| 二、骨髓间充质干细胞 |
| 三、生物支架材料 |
| 四、脱细胞真皮基质的优势 |
| 五、组织工程的研究现状 |
| 1. 组织工程支架研究进展 |
| 2. 组织工程的种子细胞研究进展 |
| 3. 组织器官构建的研究进展 |
| 4. 组织工程化组织与器官在临床上的挑战 |
| 六、课题的提出 |
| 第二部分 试验研究 |
| 前言 |
| 第一章 FBADM 的表面特征与结构 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料与设备 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 外观特征 |
| 1.2.2 结构测定 |
| 1.2.2.1 石蜡切片制备与 H.E 染色 |
| 1.2.2.2 扫描电镜观察 |
| 1.2.2.3 透视电镜观察 |
| 1.2.2.4 DNA 残留提取 |
| 1.2.3 保存与灭菌 |
| 1.2.3.1 冷冻干燥保存 |
| 1.2.3.2 Co~(60)辐照灭菌 |
| 1.2.3.3 冷冻干燥及辐照灭菌后的复水效果 |
| 2. 结果 |
| 2.1 外观特征观察 |
| 2.2 结构检测结果 |
| 2.2.1 石蜡切片及 H.E 染色的结果 |
| 2.2.2 扫描电镜下的形态与结构 |
| 2.2.3 透视电镜观察 |
| 2.2.4 DNA 残留 |
| 2.3 保存与灭菌 |
| 2.3.1 冷冻干燥 |
| 2.3.2 复水软化 |
| 2.3.3 Co~(60)辐照灭菌剂量确定 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 第二章 FBADM 的生物相容性 |
| 引言 |
| 第一节 实验动物体内埋植试验 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 埋植材料 |
| 1.1.2 实验动物 |
| 1.1.3 其它 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 材料的准备 |
| 1.2.2 皮下埋植 |
| 1.2.3 观测 |
| 2. 试验结果 |
| 2.1 活体观察 |
| 2.2 石蜡切片观察 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 第二节 FBADM 的体外细胞相容性 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验设备 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 试验用 FBADM 的准备 |
| 1.2.2 准备细胞悬液 |
| 1.2.3 细胞接种与培养 |
| 1.2.4 细胞生长监测 |
| 1.2.4.1 细胞生长曲线和细胞活力测定 |
| 1.2.4.2 细胞形态观察 |
| 2. 结果 |
| 2.1 细胞的生长增殖 |
| 2.2 细胞的活力检测 |
| 2.3 细胞形态观察 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 第三章 FBADM 作为皮肤组织工程支架的研究 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料与设备 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验仪器和设备 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 FBADM 的准备 |
| 1.2.2 制备细胞悬液 |
| 1.2.3 接种细胞 |
| 1.2.4 观察与检测 |
| 2. 结果 |
| 2.1 FBADM 对细胞生长的影响 |
| 2.2 FBADM 与损伤愈合 |
| 2.3 FBADM 与血管形成 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 第四章 FBADM 作为干细胞培养支架的研究 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料与设备 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验设备 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 hBM-MSCs 细胞的复苏 |
| 1.2.2 hBM-MSCs 细胞的分化特性鉴定 |
| 1.2.3 hBM-MSCs 在 FBADM 上的增殖培养 |
| 1.2.3.1 FBADM 的准备 |
| 1.2.3.2 细胞接种 |
| 1.2.3.3 细胞生长监测 |
| 2. 结果 |
| 2.1 复苏后 hBM-MSCs 的分化特性 |
| 2.2 hBM-MSCs 在 FBADM 上的增殖与分化 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 第五章 hBM-MSCs 在 FBADM 上软骨分化诱导 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料与设备 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验设备 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 24 孔板培养法 |
| 1.2.1.1 细胞悬液制备 |
| 1.2.1.2 FBADM 准备 |
| 1.2.1.3 细胞接种与分化诱导 |
| 1.2.2 离心管深层培养法 |
| 1.2.2.1 离心管准备 |
| 1.2.2.2 细胞的准备 |
| 1.2.2.3 细胞的接种与分化诱导 |
| 1.2.4 细胞生长检测 |
| 2. 结果 |
| 2.1 平板培养法 |
| 2.2 离心管深层培养法 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 第六章 BM-MSCs 在 FBADM 上神经分化诱导 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 材料与设备 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验设备 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 BM-MSCs 的复苏与分化特性 |
| 1.2.2 FBADM 的准备 |
| 1.2.3 细胞接种与增殖培养 |
| 1.2.4 神经分化诱导培养与控制 |
| 1.2.5 免疫荧光染色 |
| 1.2.6 扫描电子显微镜样品准备 |
| 1.2.7 石腊切片 |
| 1.2.8 SPSS 统计软件 |
| 2. 结果 |
| 2.1 倒置相差显微镜的观察结果 |
| 2.2 免疫荧光染色 |
| 2.3 SEM 观察结果 |
| 2.4 石蜡切片 |
| 2.5 SPSS 分析结果 |
| 3. 分析讨论 |
| 4. 结论 |
| 全文主要结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 在读期间发表论文和研究成果 |
| 导师简介 |
| 致谢 |
（9）异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 异体脱细胞真皮基质: |
| 1.2 临床资料: |
| 1.3手术方法: |
| 1.4 创面愈合后外观和功能比较: |
| 2 结果 |
| 2.1 创面愈合过程观察: |
| 2.2 创面愈合后外观和功能比较: |
| 2.3 典型病例 |
| 2.3.1 病例l: |
| 2.3.2 病例2: |
| 3 讨论 |
（10）皮肤扩张器的改造及其在构建自体复合皮中的应用（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法和步骤 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 论文图片资料 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间完成的论文 |
四、异体真皮对复合皮功能重建的作用研究（论文参考文献）
- [1]复杂软组织缺损的修复策略与功能重建[J]. 沈余明. 中华创伤杂志, 2021(06)
- [2]抗感染/抗炎功能化组织修复材料的制备与性能研究[D]. 钟日晟. 湖南大学, 2019(06)
- [3]烧伤瘢痕表皮结合组织工程真皮治疗瘢痕的临床研究[D]. 崔泽龙. 广西医科大学, 2019(07)
- [4]脱细胞猪小肠黏膜下层与脱细胞猪真皮基质作为真皮支架的对比研究[D]. 吴晴晴. 苏州大学, 2019(04)
- [5]海洋细菌的筛选鉴定及海洋细菌蛋白酶在组织工程中的应用潜力评价[D]. 刘畅. 山东大学, 2017(05)
- [6]激光微孔脱细胞猪真皮支架对Ⅲ度皮肤烧伤血管化的影响[D]. 盛小辉. 天津医科大学, 2016(03)
- [7]脱细胞同种异体真皮与自体刃厚皮复合移植烧伤功能部位修复创面[J]. 柯昌能,刘坡,陈杰明,李艳华,梁大宁. 中国组织工程研究, 2015(29)
- [8]胎牛皮脱细胞真皮基质在组织工程中的应用[D]. 冯玉萍. 甘肃农业大学, 2014(05)
- [9]异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植的临床应用[J]. 李守聚. 中国美容医学, 2012(11)
- [10]皮肤扩张器的改造及其在构建自体复合皮中的应用[D]. 何丽霞. 重庆医科大学, 2011(11)