核酸的提取与纯化论文摘要

核酸的提取与纯化论文摘要

问:怎样从细胞中提取核酸论文
  1. 答:论文一般由时间(指事件发生的时间)、
    地点(指事件发生的地方)、人物(指事件的中心人物)、事件(起因、经过、结果)构成。
问:在核酸的分离提取和纯化过程中,都利用核酸的哪些生物学特性?
  1. 答:核酸(nucleic acid)是遗传信息的携带者,是基因表达的物质基础。无论是进行核酸结构还是功能研究,首先需要对核酸进行分离和纯化。核酸样品质量将直接关系到实验的成败。核酸分离、纯化原则:1.保持核酸分子一级结构的完整性。因为遗传信息全部储存在一级结构之中,核酸的—级结构还决定其高级结构的形式以及和其他生物大分子结合的方式。2.分离核酸原则:1)温度不要过高;2)控制pH值范围(pH值5-9); 3)保持一定离子强度; 4)减少物理因素对核酸的机械剪切力.
    在核酸分离提取中最重要的是要防止核酸的生物降解,细胞内或外来的各种核酸酶能消化核酸链中的磷酸二酯键,破坏核酸一级结构。所用器械和一些试剂需高温灭菌,提取缓冲液中需加核酸酶抑制剂。
    常用的DNA酶抑制剂有1.金属离子螯合剂:如EDTA-Na2(乙二胺四乙酸二钠)、8-羟基喹啉。2.阴离于型表面活性剂如SDS,该试剂除对核酸酶有抑制作用外,还能使蛋白质变性,并与变性蛋白结合成带负电荷的复合物,该复合物在高盐溶液中沉淀。
    常用的RNA酶(RNAase)抑制剂有:1.皂土(bentonite )作用机制:皂土带负电荷,能吸附RNase,使其失活。2. DEPC(二乙基焦碳酸盐) (C2H5OCOOCOOC2H5)粘性液体,很强的核酸酶抑制剂。作用机制:与蛋白质中His结合使蛋白变性。
    以上答案希望对你有帮助。
  2. 答:分子量大小,等电点,带电离子,结合位点。
问:核酸分离提取的原则是什么?
  1. 答:核酸包括DNA、 RNA两种分子, 在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。 真核生物的染色体DNA为双链线性分子, 原核生物的“染色体”、 质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子; 有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子, RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子, 不同类型的RNA分子可以具有不同的结构特点, 如真核mRNA分子多数在3’端带有poly(A)结构, 至于病毒的DNA、 RNA分子, 其存在形式多种多样,有双链环状、 单链环状、 双链线状及单链线状等。
    HYGROMYCIN B < >生物帮上面有详细介绍。
核酸的提取与纯化论文摘要
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