人源化小鼠的制备硕士论文
问：人源化小鼠模型对人类生物医学研究贡献有多大?
- 答：人源化小鼠模型是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型。这种模型通常被用于人类疾病体内研究(in vivo study)的活体替代模型。由于人类生理与动物生理有显著的差别，利用动物模型得到的实验结果有时不能适用到人体上。比如，有些利用小鼠等动物模型开发的药物在人体上并没有效果。所以，利用转基因或同源重组的方法，将人类基因“放置”在小鼠模型上所制备的人源化小鼠模型，大大提高了这类小鼠模型作为模拟某些人类疾病的有效性。
应用：在艾滋病、癌症、传染病、人类退化性疾病、血液病研究领域等都有广泛的应用；药物临床前模拟实验。
我也是抄的，其实就是改造过的小白鼠。
问：人源化抗体是如何制备的？protocol越详细越好。
- 答：据我了解。。以G抗体来讲。。除了超变区的CD1，CD2，CD3保留鼠源化之外。。其他的地方全部人源化。。可以产生两种：1》人鼠嵌合抗体和2》完全人源化抗体，具体的原理是1》利用基因重组技术，先得到鼠单抗重轻链可变区的基因片段，将其插入控制人单抗恒定区的基因载体上，表达便可以产生嵌合式抗体。。2》首先将小鼠表达鼠源化单抗重轻链的基因剔除，制备表达人源化单抗重轻链基因的转基因小鼠，上诉两种小鼠进行回交，产生只表达人lg的小鼠，用抗原免疫之后即可获得。。我就知道这些啦，，希望对你有所帮助，累死我啦
问：制备转基因小鼠的原理是，目的基因在小鼠体内成功表达的原因是什么
- 答：以“限制性核酸内切酶”在特定的切点上切割DNA分子，将两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后，末端可以相互黏合，脱氧核糖和磷酸构成的骨架要用DNA连接酶“缝合”
- 答：组成生物的DNA分子 的空间结构和化学组成 一致，表达成功是所有生物共用一套密码子
问：如何用crisp/cas9制作转基因小鼠
- 答：您好，具体制备的流程如下：针对待转入外源基因的位点进行sgRNA的设计，同时做靶位点的测序；进行sgRNA-Cas9质粒的构建；sgRNA活性检测；sgRNA-Cas9质粒体外转录成mRNA;带有外源基因的打靶载体构建；小鼠受精卵的分离；mRNA注射入小鼠受精卵；受精卵移植代孕母鼠的输卵管；小鼠出生后进行基因型鉴定。
利用CRISPR/Cas9技术制备的转基因小鼠是定点插入，不同于传统的随机转基因。
本文来源: https://www.lw766.cn/article/18237c72f8f9133d2be6ec3a.html